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如何避免DNA鑒定的污染

發布人:admin來源:本站原創時間:2013年08月03日

    90年代初,德國曾發生一起轟動全國的案件,從這個連續多起殺人并偷竊的案件獲得的證據均指向同一名女性罪犯分子,她的DNA圖譜分別出現在40起不同案件中,并橫跨德國、奧地利和法國三地。然而16年后的真相令人啼笑皆非,這僅僅是一件因DNA污染而誤導警方案件調查的案例,所有案件背后并沒有令人發指的惡魔存在,所發現的DNA圖譜均來自于提取遺傳證據所用棉簽拭子生產線上的工作人員。同樣地,歐洲、美國和澳大利亞的法醫科學實驗室也發生過類似的案例。已有資料表明,在歐洲數據庫的6百萬份罪犯的DNA信息中,已摻雜了部分刑偵人員、實驗室研究人員和耗材生產人員的DNA信息。

      英國法庭科學服務局(FSS)通過對比塑料耗材生產人員的DNA圖譜和案件中獲取的DNA圖譜發現,用來收集、處理和分析DNA樣品的耗材在生產過程中發生了DNA污染。系統測試結果表明,每25,000個產品如一次性手套、反應器皿、吸頭和棉簽拭子的生產過程就會產生一條完整的人類DNA基因圖譜的污染。因此,歐盟、美國和澳大利亞的法醫科學研究所聯盟(ENFSI, SWGDAM和BASG)提議建立行業規定,防止因錯誤DNA數據而造成的刑偵調查投入的巨大浪費,并確保警察局登記處登記資料的準確性。這些措施能大大降低生產過程帶來的污染,也可消除痕量DNA合成后的降解。

      然而令人尬尷的事情是,在“耗時16年的德國女性罪犯“案件中使用的棉簽拭子沒有經過“無DNA”質檢,人們也沒有對其給予足夠的重視。直至今日,仍然沒有統一標準來確保STR(短串聯DNA重復序列)分析中所使用的耗材和試劑是不含DNA的(標準:DNA濃度應小于6pg)。因此,德國聯邦刑事警察局(BKA)聯合法醫科學研究所聯盟-ENFSI, SWGDAM和BASG-計劃定制一系列措施,確保其DNA數據庫免受事故以外的其他污染。

      “這種問題是全球性的,不只德國存在”,德國聯邦刑警局DNA實驗室副主任Ingo Bastisch博士在給DNA分析耗材廠商的信中這樣寫道。2009年,德國聯邦刑警局專家與耗材廠商在德國生命科學供應商協會討論如何建立行業規定。為防止污染的發生,德國警局計劃設立產品認證標準。法醫科學研究院聯盟負責建立生產過程中的認證和質控流程,以確保產品送至警局時都不會受到DNA污染。所有規定包括:
       1. 自動化生產線
       2. 將工作人員與生產線的接觸降低到最小的程度
       3. 潔凈的生產車間(工作人員穿隔離衣服、車間正向空氣流等)
       4. 建立基于PCR的質量控制檢驗
       5. 物理方式去除生產線外后續工作的人類DNA,如環氧乙烷氣體滅菌
       6. 建立質量控制體系,確保產品不含DNA

      我國也在2009年4月,由公安部科技信息化局和刑事偵查局聯合召開DNA檢測試劑產品標準及認證工作宣貫會。會上肯定了采用國際通用的產品認證,從源頭保證產品質量和安全。公安部要求自2009年8月1日起,各級公安機關新采購的DNA檢測試劑產品,必須通過中國安全技術防范認證中心的認證,并加施“GA”認證標志。未通過認證的DNA檢測試劑產品,不得用于辦案和DNA數據庫建設。

      然而對于消耗品目前還沒有建立質量控制標準,法醫DNA實驗室對于關鍵耗材如離心管、吸頭、棉簽拭子等使用前先要自行對其進行質量控制檢驗,確認其指標合格后才能用于DNA檢驗。因此選擇高純度級別、提供質檢證書的耗材,不僅可節省人力成本,更重要的是降低因人員參與而造成的自身污染或交叉污染。

      為了排除參與人員對DNA鑒定結果的污染,法醫科學研究所還號召建立國際性的“DNA排查數據庫”,即將法醫實驗室人員、現場警員和生命科學耗材生產人員的DNA圖譜納入其中,以便排除錯誤的基因圖譜,確保獲得正確的數據。英國國家DNA數據庫(NDNAD)是世界上最早、最大、發揮作用最好的數據庫,其中建立了現場警員排除庫、實驗室人員排除庫和耗材生產人員排除庫。目前,越來越多的法醫實驗室和警局對建立匿名的、基于單位的數據庫非常感興趣。“自覺地自我承諾使數據庫具有廣泛意義,”Eppendorf公司的Claudia Hoffmann說道,由于原有方式幾乎不可能追溯到工作人員層面,因此DNA排查數據庫這將會使追溯工作更有效。

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